Defesa de Tese de Doutorado #416 – Egleidson Frederik do Amaral Gomes – 29/06/2023

A cada dia tem crescido o interesse na utilização das técnicas de microscopia não linear, principalmente para análise e imageamento de tecidos biológicos. Dentre essas técnicas, a microscopia por geração de segundo harmônico (SHG) e fotoluminescência por absorção de dois fótons (PL), tem sido as mais importantes e de maiores utilizações quando se trata da análise e prognóstico de tumores. As principais razões para essa crescente utilização vem do fato de ser uma técnica não invasiva, não necessitar da utilização de corantes ou qualquer outro tipo de preparação nas biópsias, e poder ser utilizada em diversas situações como amostras in vivo, tecidos fixados, sistemas in vitro 3D, entre outros.
O câncer de próstata tem uma evolução lenta e os principais marcadores prognósticos utilizados atualmente são a idade do paciente, o antígeno prostático específico e o sistema de graduação Gleason que quantifica o grau histológico. No entanto, esses marcadores não conseguem prever com grande acurácia o comportamento biológico do tumor, já que o tumor altera o ambiente a sua volta. Uma modificação relevante acontece no estroma, denominada de estroma reativo. Acredita-se que estudá-lo pode ajudar na graduação histológica e na determinação de prognósticos mais precisos.
Neste trabalho utilizamos microscopia por SHG e PL, para estudo de biópsias de tecido de próstata fixadas em lâminas histológicas. As imagens de SHG nos permitem analisar as fibras de colágeno, que sofrem alterações na presença de um tumor, tanto na forma das fibras quanto em sua organização. E as imagens de PL permitem obter informações sobre a parte celular do tecido. Apresentamos resultados para amostras separadas em 3 grupos de análise. O primeiro deles é atualmente o padrão para a graduação histológica para os prognósticos de câncer de próstata, sistema Gleason. Os outros dois grupos foram propostos levando-se em consideração as alterações estruturais que ocorrem nos ácinos e no estroma do tecido de próstata na presença de um tumor. Apresentamos também novas metodologias de análises das imagens de SHG e PL pelo uso de um software desenvolvido para separar automaticamente as imagens em regiões de fibras e de células, o PyFibre. As métricas obtidas pelo software, foram propostas com o objetivo de quantificar as mudanças nas estruturas celulares e de estroma observadas pelos patologistas. Com os parâmetros obtidos realizamos análises estatísticas por LDA (Linear Discriminant Analysis) que permitiram entender as alterações no tecido e separar com sucesso os tipos de classificação de câncer estudados.

Tópico: Defesa de Tese – Egleidson Frederik do Amaral Gomes
Hora: 29 jun. 2023 09:00 da manhã São Paulo

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