Dissertação de Mestrado #740 – Bruno Guimarães Santana Gomes – 26/11/2024

As bolsas de sangue são frequentemente irradiadas para prevenir a doença do enxerto contra o hospedeiro associada à transfusão. Embora a avaliação de hemácias (RBC) irradiadas exija a medição de parâmetros bioquímicos, ainda existe uma lacuna de pesquisa na compreensão do impacto da irradiação na estrutura biomecânica das células vivas, particularmente nas hemácias com estruturas proteicas alteradas e aumento da rigidez da membrana. Este trabalho utiliza a microscopia de desfocalização (MD), uma técnica óptica não invasiva de campo claro, para estudar as flutuações da membrana por meio da aquisição de imagens das hemácias para uma análise quantitativa das suas propriedades biomecânicas. Amostras de sangue total foram obtidas através de punção digital, diluídas em uma solução de PBS e 1% BSA e dispostas em placas com fundo de vidro. Um total de 280 hemácias individuais foram analisadas ao longo de 6 experimentos, com dois grupos de controle por experimento. Uma dose de 50Gy (600 MU/min) utilizando fótons de 6 MV (Elekta Synergy) foi administrada. A MD nos forneceu o contraste da intensidade da membrana das hemácias. Funções de autocorrelação foram processadas utilizando o software ImageJ. Os tempos característicos de relaxação da membrana foram determinados por meio de ajustes de funções exponenciais. Grupos irradiados e de controle foram testados por até 7 horas e avaliados usando two-way ANOVA com teste post-hoc de Tukey. As flutuações da membrana, refletidas pelos tempos de relaxação (propriedades mecânicas locais da membrana-citoesqueleto, como viscosidade e módulo de flexão), diferiram significativamente entre os grupos irradiados (2h: 2,92 ms, 4h: 2,75 ms) e os grupos de controle (2h: 4,20 ms, 4h: 3,74 ms), mostrando uma redução de 31% e 27% nas RBCs irradiadas. Esta metodologia de MD oferece novas perspectivas para a análise quantitativa da dinâmica das RBC irradiadas. Investigações adicionais podem ser realizadas para estabelecer correlações entre doses de radiação e automatizar a seleção, gravação e análise dos filmes celulares.

Palavras-chave: Hemácia irradiada, Flutuação de membrana, Microscopia de desfocalização, Relaxação, Dose de radiação.

Link para assistir a defesa:https://zoom.us/j/97096835061?pwd=MMmvIox7LfkM7msNCLtVFKwmcep01N.1

Senha: 647364.