Dissertação de Mestrado #574: Jéssica Silva

Dinâmica de Sistemas Biológicos Via Microscopia de Desfocalização

Autor: Jéssica Rodrigues Silva

Banca Avaliadora

Ubirajara Agero Batista (orientador)

Física - UFMG

Flávio Augusto de Melo Marques (coorientador)

Física - UFLA

Luiz Alberto Cury

Física - UFMG

Leandro Malard Moreira

Física - UFMG

Orientadores

Ubirajara Agero Batista (orientador)

Departamento de Física - UFMG

Flávio Augusto de Melo Marques (coorientador)

Departamento de Física - UFLA

Resumo do Trabalho

A Microscopia de Desfocalização (MD), técnica desenvolvida no laboratório de Sistemas Biológicos do Departamento de Física da UFMG, tem mostrado ser bastante atraente por ser de fácil utilização e capaz de determinar mudança de fase de objetos transparentes. Através dela, podemos caracterizar objetos de fase utilizando um microscópio convencional de campo claro. No caso de células, temos acesso a parâmetros morfológicos e biomecânicos. Isso é possível porque o contraste das imagens, é proporcional à curvatura da membrana celular. Este trabalho tem como objetivo desenvolver um método para o estudo de objetos de fase durante um fenômeno dinâmico e consequentemente ter acesso a imagem tridimensional dinâmica do sistema. Para tal, foi colocado ao final dos elementos ópticos do microscópio um semi-espelho, 50:50, e duas câmeras de vídeo, sendo uma para cada componente, refletida e transmitida no semi-espelho, com distâncias diferentes em relação ao plano focal do objeto de fase. Dessa forma, temos duas imagens instantâneas desfocalizadas uma em relação a outra e com isso, podemos observar o comportamento de duas membranas celulares ao mesmo tempo. Para testar o método, utilizamos hemácias como objeto de fase, pois é uma célula simples, sem núcleos ou organelas, e a submetemos a uma diferença de pressão osmótica. A reconstrução 3D do sistema foi feita, mostrando que com este método é possível observar objetos de fase num processo dinâmico.